編號:WB-0071 | 規格:50ml |
價格:80.00 | 數量:大量 |
產地:鼎國 |
包裝清單:
RIPA裂解液 |
50ml(- |
PMSF(100X) |
550ul(- |
使用說明書 |
1份 |
使用說明 :
1.培養細胞
取出裂解液,待融化后顛倒混勻數次,適量分裝凍存。在使用前取出PMSF(
貼壁細胞:去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗2-3遍(如血清中的蛋白沒有干擾,也可以不洗)。按6孔板每孔加入100-200微升的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞數秒后細胞就會被裂解。
懸浮細胞:收集培養細胞,離心去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗2-3遍(如血清中的蛋白沒有干擾,也可以不洗),用手指把細胞用力彈散,按6孔板每孔細胞加入100-200微升的比例加入裂解液。如果細胞數量較大,應按50-100萬細胞/管分裝或根據細胞數量按比例增加裂解液。用手指輕彈管底以促進裂解液和細胞充分接觸,裂解完全時應無明顯的細胞顆粒。
裂解物經10,000
裂解液用量說明:通常6孔板每孔細胞加入100微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到150微升或200微升。
2.組織樣品
取Ep管,分別稱重標記,把組織剪切成小塊裝入Ep管中,稱重。按每20毫克組織加100-200微升的比例加入裂解液(如裂解不完全,可以適當增加用量;如需要的蛋白樣品濃度較高,可以適當減少用量)。用手握式電動組織細胞勻漿器勻漿約1分鐘或直至充分裂解。10,000
如果組織樣品本身非常細小,如淋巴細胞,可直接加入裂解液,通過振蕩(Vortex)以使樣品裂解完全。
保存條件:
PMSF需-
注意事項 :
1.為獲得最佳的實驗效果,可適當分裝使用,以盡量避免反復凍融。
2.PMSF應現用現加。
3.裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或
4.蛋白酶抑制劑均有較高的毒性,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。一旦直接接觸,請立即用流水沖洗,再向醫療保健結構咨詢。
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