北京鼎國Biotin SP-HRP（生物素-鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶）免疫組化試劑盒適用于冰凍切片和石蠟切片上細胞表面抗原及細胞內抗原的準確、快速定位分析。同時，也可用于培養和固定的細胞、血細胞涂片的免疫組化和細胞化學分析。規格分別為0.5ml/1000-2000片和1ml/2000-4000片。

試劑盒組成

a)         DGSP-N-KIT-1 內源性過氧化物酶阻斷劑濃縮液，稀釋倍數1:10（甲醇稀釋）。

b)        DGSP-N-KIT-2 正常動物非免疫血清濃縮液，稀釋倍數1:20（0.1M PBS稀釋）。

c)         DGSP-N-KIT-3 生物素標記的第二抗體濃縮液，稀釋倍數1:100-500。

d)        DGSP-N-KIT-4 鏈霉菌抗生物素蛋白-HRP濃縮液，稀釋倍數1:100-1000。

自備試劑及用品

a)         一抗

b)        淋洗緩沖液（鼎國生物：PBS磷酸鹽緩沖液系列BF-0011/0012/0013/0014）

c)         蒸餾水

d)        復染劑（鼎國生物：AR-0711/0712/0721/0722/0771/0772）

e)         封片劑（鼎國生物：AR-0811）

f)         免疫組化用PAP筆

g)        孵育盒（鼎國生物：AR-0951/0952）

h)        定時器（鼎國生物：AR-0961/0962）

i)          顯微鏡

j)          DAB顯色劑（鼎國生物：DAB系列試劑盒AR-0611/0612/0613）

k)        抗體稀釋液（定國生物：抗體稀釋液系列AR-0411/0412）

染色步驟

1.    石蠟切片用二甲苯脫蠟，梯度酒精水化后，在蒸餾水中漂洗5min。

2.    用0.01M PBS（pH=7.4）洗3次， 每次3min。

3.     除去PBS液，每張切片加1滴或50μl 內源性過氧化物酶阻斷劑工作液，室溫下孵育10-30min。

4.    用0.01M PBS（pH=7.4）洗3次， 每次5min。（此步后可進行抗原修復）

5.     每張切片加1滴或50μl正常動物非免疫血清工作液，37℃孵育10-30min。

6.     除去血清，不洗，每張切片加1 滴或50μl的第一抗體工作液，37℃孵育1h或4℃過夜。

7.     用0.01M PBS（pH=7.4）洗3次， 每次5min。

8.     除去PBS液，每張切片加1 滴或50μl 生物素標記的第二抗體工作液，37℃孵育30min。

9.     用0.01M PBS（pH=7.4）洗3次， 每次5min。

10. 除去PBS液，每張切片加1滴或50μl 鏈霉菌抗生物素蛋白-HRP工作液，37℃孵育30min。

11. 用0.01M PBS（pH=7.4）洗3次， 每次5min。

12. 除去PBS液，每張切片加1滴或50 μl DAB顯色液，觀察1-15min，陽性顯色為黃褐色。

13. DAB染色后，自來水沖洗，蘇木素復染。

14. 復染后，蒸餾水沖洗，脫水，透明，中性樹膠封片。

保存和有效期：