目錄號:FZ-6 | 規格:詢價 |
SRAP標記(Sequence-related amplified polymorphism,序列相關擴增多態性),是由Li和Quiros 開發的一種新的分子標記技術。SRAP標記具有簡便、穩定、在基因組中分布均勻的特點,已被廣泛應用。
利用獨特的引物設計對ORF進行擴增,上游引物長17 bp,5’ 端的前10 bp 是一段填充序列,接著是CCGG,組成核心序列及3’ 端3個選擇性堿基 ,對外顯子進行擴增。下游引物長18 bp,5’ 端的前11bp是一段填充序列,接著是AATT,組成核心序列及3’ 端3個選擇性堿基,擴增內含子區域、啟動子區域,因個體不同以及物種的內含子、啟動子與間隔長度不等而產生多態性。
常見問題解答
1)公司是否有SRAP引物組合及相關實驗費用?
公司現有64對引物組合,全部為熒光標記,除公司提供的引物外,客戶可依據實驗要求,合成相應的引物,公司收費為300元/一對(包括2條引物,其中一條為熒光標記),收費標準按30個樣/6000元,6-8對引物,樣本量多可協商。
2)是否可以做銀染?
銀染也可以做,但我們推薦客戶做熒光標記,這樣盡量避免了在實驗操作上、人工統計數據上人為因素造成的差異,采用ABI377測序儀電泳,我們得到的圖片會比銀染更清晰,另一方面數據采用軟件分析,保證了數據的準確性。
3)是否可以指出差異帶的具體位置及回收克隆差異帶,作為一個新的鑒定標記?
我們提供給客戶的數據包括原始數據、01數據,原始數據及每對引物組合擴增后的每個片段的大小,客戶可根據數據找出差異帶的具體位置。我們不做差異帶的回收克隆。
4)如何保證篩選后的引物是多態的引物?
我們一般會用20個左右的樣本,用銀染的方法,做預實驗篩選差異帶明顯,擴增清晰的引物組合,選好引物后,再開始正式實驗。
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